基因扩增实验又称PCR实验,其特点是能将微量的DNA大幅增加,PCR是分子生物学研究和实验的常规方法,广泛应用于生物学各个领域,例如:检验艾滋病、乙型肝炎、禽疫病、癌基因的检测和诊断,DNA指纹、个体识别、亲自鉴别及法医物证,动、植物检疫,动物及其衍生产品检测,动物饲料、化妆品、食品卫生检测,转基因作物与转基因微生物检测等。
PCR实验室平面布局
基因扩增实验室又称PCR实验室,实验室原则上分为4个单独的工作区域,前两区为扩增前区,后两区为扩增后区。扩增前区与扩增后区应严格分开。实验材料、试剂、记录纸、笔、清洁材料等,只能从扩增前区流向扩增后区,即从试剂准备区→样品制备区→扩增区→扩增产物分析区,不得逆向流动。实验室的气流也应从扩增前区流向扩增后区,不得逆向流动。各工作区域应设置缓冲间,工作间与缓冲间之间宜安装连锁装置。
不同功能的核酸检验工作区应使分格独立的工作室,并有明显的标志,各区间不能直通。各区之间如果是紧密相连,需安装物品传递窗。每个工作区域的顶部应安装紫外灯,紫外灯的波长为254nm,安装数量为每20m²安装一支40W的紫外灯。
实验室较为理想的布局模式为有一个专用走廊,试剂准备区、样品制备区、扩增区和产物分析区很规范地排列在一起,前三个区各有一个缓冲间,可供换工作服和工作鞋使用,顶上可装一紫外灯。
内实验区域设为正压或常压状态,缓冲间内设为负压状态(可上设一抽风装置),使这三个区的空气流向为由实验区域内向外,缓冲间内通向实验室和走廊的门可安装一种连锁装置,当一个门打开时,另一门必须处于关闭状态,防止出现两个门同时打开的情况。
产物分析区可不设缓冲间,但应设为负压状态(装一个排风扇即可),使空气流向由外向内,以防止扩增产物的随空气流出。每一区域都必须有明确的标记,工作按试剂准备区、样品制备区、扩增区至产物分析区单一流向进行,各区的仪器设备包括工作服、鞋、实验记录本和笔都必须专用。
如果无法做到以上模式,以下基本要求必须做到:
(1)四个区域必须是相互独立的。
(2)各区的仪器设备及各种物品必须是专用的。
(3)各区完全独立,缓冲间可有可无。如为一个区套一个区的模式,取件不能直通,应有缓冲间,供换工作服及鞋子用,并保证两个区域间始终处于完全的分隔状态。
(4)产物分析区应安装排风扇或其他抽风装置,维持负压。
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